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    外周血染色体检测检验前质量控制

    日期:2017-11-22 17:32:06 来源:中华检验医学网 点击:
    中国合格评定国家认可委员会于2013年11月22日发布的、检验中和检验后。不同阶段对检验质量的影响因素有所不同。细胞遗传实验室需充分考虑影响染色体检测的各种因素,并严格加以控制。研究发现,影响检验结果的80%质量问题是由检验前因素造成的。因此,做好检验前质量控制是保证染色体检测质量的重点。检验前质量控制应包括患者病史采集患者准备、标本采集和标本运输储存等多个方面。本文分析了2011年1月至2016年6月于笔者所在医院就诊的1863例患者外周血染色体检测结果,并参考相关文献报道,同时结合实际工作经验,对外周血染色体检测的检验前质量控制与注意事项分析如下。
    标本检测结果分析
    患者外周血染色体检测结果,初步判断影响染色体检测结果的检验前因素包括患者病史采集、患者准备、标本采集、标本运输与储存、培养基及耗材质量。

    讨论
    全面采集患者病史对保证染色体检测结果质量至关重要,特别是染色体病嵌合型患者。患者病史信息提示存在影响染色体核型分析的因素时,检验者会增加分析计数,从而发现比例较低的嵌合,如果病史采集不完整,缺少相关信息,可能会使检验者忽略异常核型,导致漏报。笔者临床工作中遇有1例不育患者,常规计数20个分裂相,分析5个核型,结果显示除Y染色体怀疑qh+外,未发现其他异常,C显带检测发现1个分裂相为47,XYY,加大计数分裂相至100个,发现7个分裂相为47,XYY,最终确定患者核型为46,XY/47,XYY。在回访结果显示,该例患者存在弱精症等47,XYY综合征部分临床表现。但在检测前采集病史时,未采集到相关信息,若未进行C显带检测,有可能导致漏诊。为保证患者病史信息的完整,应尽量由临床医生进行病史采集,并将实验室需要的对疾病有提示性的信息做成表格,在病史采集过程中逐项填,以防止遗漏。

    外周血染色体检测通常采用预约采血的方式采集标本。在预约时,应简单询问患者近况,如就医情况等,如患者已进行其他项目检测,应建议患者在采集标本时携带检验结果,以便于采集信息。抗菌药物、造影剂等药物会造成淋巴细胞培养失败、淋巴细胞收获少、染色体分裂相少、染色体显带困难等现象。因此,在采集病史时,一定要了解患者近期药物使用情况,如患者正在或近期服用过抗菌药物、造影剂等药物,应告知患者在停药1周后再采集外周血标本。在预约时,应告知患者在采集外周血标本前,需空腹至少8h,避免脂血、乳糜血造成细胞培养困难。

    采集外周血标本应使用真空采血管,抗凝剂建议使用肝素钠,也可使用肝素锂抗凝管。采血后应轻轻颠倒混匀数次,使抗凝剂与血液充分接触、溶解,防止凝固。用于染色体检测的外周血标本一般需培养68~72h,而培养基非常适合细菌生长,因此在采集标本时,一定要往意无菌操作,规范消毒,避免标本污染导致细胞培养失败。

    外周血标本在运输过程中应避免剧烈晃动和保温,以避免标本溶血。非本实验室采集的标本在预约检测时,需告知标本运输过程中的注意事项,特别是在室内外温差较大时,更应往意标本保温运输。标本一旦溶血,将导致培养获得的淋巴细胞少,分裂相少,显带困难和带纹不清晰。外周血标本室温保存时间应不超过8h,当日无法接种的标本和接种后的标本可4C°保存。4C°保存7d之内的标本,接种培养结果可以接受,但一般不要保存超过3d。
      外周血染色体检测可采用成品培养基,也可采用实验室自配培养基。谷氨酰胺是合成核酸和蛋白质的必需氨基酸,因此实验室自配培养基应选用添加谷氨酰胺的1640培养基。谷氨酰胺不稳定,4C°存放超过1周的培养基,应在加入与原培养基等量的谷氨酰胺后再使用。成品培养基与自配培养基均应-20C°保存,并避免反复冻融。每批次新进或新配制培养基都应以原培养基为对照,进行平行培养实验,以验证培养基的质量。应避免使用质量不符合要求的培养基。
    实验耗材,如真空采血管、注射器、离心管、一次吸管等质量不合格,也可导致染色体制备实验失败,如细胞培养失败、细胞收获失败或显带困难等。因此,在更换实验耗材后,应对新的耗材进行质量检测,检测合格方可使用。耗材质量检测也可采用平行实验,且每次实验最好只针对某一种耗材进行检测,以便于发现问题。

    外周血染色体检测作为细胞遗传学检测方法之一,存在一定的局限性,多为手工检测,从标本采集到发出报告实验过程步骤繁多,人为影响因素较多,任何一个环节的失误都可能造成实验失败,至导致结果错误或漏诊。影响检验结果的检验前因素较多,涉及各个方面,而检验前质量控制往往容易被忽视。要解决外周血染色体检测检验前质量问题,首先应提高分析前阶段的质量保证工作,提高对标本质量重要性的认识,尤其应往意患者信息采集和患者准备。

    染色体检测的检验前质量控制是确保检测结果准确性的重要前提与基础,细胞遗传实验室应重视影响染色体检测的检验前因素,并严格加以控制。


    (责任编辑:sgx)

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